Molecular Differentiation of Rural Tuberculosis Cases in Mato Grosso: Investigating the Rv2807 and TbD1 Genes by Nested q-PCR

Among infectious diseases, human tuberculosis (TB) remains one of the major public health problems. Information regarding groups vulnerable to this disease caused by Mycobacterium bovis is scarce both nationally and internationally. Therefore, this research aimed to investigate the occurrence of M. bovis among patients with sputum positive for the Mycobacterium tuberculosis complex (TBMC), from rural areas of some cities in Mato Grosso. To this end, the target gene Rv2807 was evaluated using Nested q-PCR to confirm TBMC, and for M. bovis by detecting the TbD1 region, directly from DNA extracted from nine sputum samples with positive TBMC cultures provided by LACEN-MT, selected from 61 individuals diagnosed with pulmonary tuberculosis by LACEN/MT between 2017 and 2023. After heat inactivation using the Dneasy Blood & Tissue kit - Qiagen, DNA was extracted according to the manufacturer's instructions. The nine samples tested were confirmed as belonging to the Mycobacterium tuberculosis Complex through the presence of the Rv2807 gene. However, the TbD1 region was not observed, revealing the absence of Mycobacterium bovis among patients positive for the Mycobacterium tuberculosis Complex. Even so, this highlights the importance of investing in molecular testing for species belonging to the Mycobacterium genus in samples positive for both bovine and human tuberculosis. It should be emphasized that tuberculosis remains a serious cause of infectious health problems in Brazil, making it necessary to investigate the species detected in confirmed TB cases more precisely, especially in rural populations and agricultural workers. Keywords: Mycobacterium bovis. Tuberculosis. Mycobacterium tuberculosis Complex. One Health. Resumo Entre as doenças infecciosas a tuberculose humana (TB) permanece sendo um dos grandes problemas de saúde pública. E informações sobre grupos vulneráveis à esta patologia desencadeada pelo Mycobaterium bovis são poucas nacional e/ou internacionalmente. Portanto, esta pesquisa objetivou averiguar a ocorrência M. bovis entre pacientes com escarros positivos para o complexo Mycobacterium tuberculosis (CMTB), provenientes da zona rural de algumas cidades de Mato Grosso. Para tanto, se avaliou através do Nested q-PCR para confirmação do CMTB o gene alvo Rv2807, e para M. bovis pela detecção da região TbD1, diretamente do DNA extraído de nove amostras de escarro com cultura positiva para CMTB cedidos pelo LACEN-MT, selecionados entre 61 indivíduos diagnosticados com Tuberculose pulmonar pelo LACEN/MT no período de 2017 a 2023. Após a inativação pelo calor, e utilizando o kit Dneasy Blood & Tissue- Qiagen, extraiu-se o DNA. As nove amostras testadas foram confirmadas como pertencentes ao Complexo Mycobacterium tuberculosis, através da presença do gene Rv2807. No entanto, não se observou a presença da região TbD1, revelando a ausência de Mycobacterim bovis entre os pacientes positivos para o Complexo Mycobacterium tuberculosis. Mesmo assim se destaca aqui a importância no investimento de testagem molecular para espécies pertencentes ao gênero Mycobacterium diante de amostras positivas para tuberculose tanto bovina, quanto humana. Pode se ressaltar que a tuberculose continua uma causa grave de agravo a saúde de origem infecciosa no Brasil, sendo necessário a investigação mais precisa das espécies detectadas nos casos de TB confirmados, principalmente em população rural e trabalhadores rurais. Palavras-chave: Complexo Mycobacterium tuberculosis. Mycobacterium bovis. Tuberculose. Saúde Única.